Programa de estudios ramo: Técnicas Histológicas e Histoquímicas I (278330)

La asignatura pretende entregar al alumno de la especialidad de Histomorfofisiopatología y Citodiagnóstico los conocimientos teóricos y habilidades técnicas necesarias para un adecuado proceso de muestras biológicas humanas y animales.

La asignatura propone que el alumno maneje los principales aspectos teóricos y operacionales concernientes a la microscopía de luz; caracterización microscópica de los principales constituyentes de células , tejidos básicos y microorganismos en general.
La asignatura se halla diseñada además, para que el alumno logre ser capaz de adquirir una actitud crítica, perseverante y científica en la consecución de resultados de modo que los conocimientos adquiridos contribuyan a su formación profesional.

Objetivos Generales
Al finalizar el curso, los alumnos deberían encontrarse capacitados para:
* Aplicar los principios de la fijación, descalcificación, deshidratación, aclaramiento e infiltración al proceso de tejidos humanos y animales en general.
* Realizar una apropiada inclusión y corte de las muestras de los tejido procesados.
* Preparar acusiosamente soluciones y reactivos, aplicando conceptos de química general y matemáticas.
* Demostrar conocimiento acerca de la teoría de la técnicas de coloración en muestras de tejidos adecuadamente preparados, utilizando procedimientos de tinción tanto rutinarios como especiales.
* Demostrar conocimiento de los principios operacionales y de los componentes de aquellos equipos de laboratorio comúnmente utilizados en un laboratorio de anatomía patológica.
* Demostrar capacidad de lectura y de seguimiento de instrucciones.
* Demostrar capacidad de trabajo en equipo.

Unidades
Instrucciones generales para el trabajo de labotarorio
Introducción.
Indicaciones generales para desarrollar el trabajo de laboratorio; las sesiones teóricas y
Evaluaciones.

1.- Nociones generales de bioseguridad
Objetivos específicos:
- Conocer y comprender los principales elementos riesgos asociados al laboratorio de Anatomía patológica.
- Aplicar las nociones de riesgo en el laboratorio por medio de la aplicación de procedimientos seguros.
- Conocer las diferentes clasificaciónes internacionales, los principales índices existentes para las diferentes sustancias existentes en el laboratorio y las políticas existentes en la eliminación de desechos considerados como tóxicos.

Contenidos.
1.1. Introducción.
1.2. Concepto de bioseguridad; riesgo y manejo del riesgo en el laboratorio.
1.3. Sustancias peligrosas.
1.4. Almacenamiento y control de reactivos.
1.5. Primeros auxilios.

2.- REPASO DE QUIMICA GENERAL
Objetivos específicos:
- Repasar los principales conceptos relacionados con la preparación de soluciones (densidad; concentración peso/peso; peso/volumen; molaridad, etc) por medio de la resolución de problemas.
- Aplicar e interpretar los resultados obtenidos mediante el cálculo matemático en relación material fungible existente y el instrumental existente.

Contenidos.
2.1. Introducción.
2.2. Preparación de soluciones.
2.3. Simulación.

3.- MICROSCOPÍA.
Objetivos específicos:
- Conocer los principios básicos del microscopio compuesto.
- Conocer los principales tipos de microscopio, sus principios físicos y la aplicación que estos tienen en ciencias biomédicas.
- Aplicar los conocimientos de microscopía instrumental en la obtención de imágenes apropiadas para el adecuado de material biológico fresco y fijado.
- Realizar el desmontaje, montaje y alineación de un microscopio de fluorescencia.

Contenidos.
3.1. Introducción.
3.2. Actividades de laboratorio.
3.2.1. Microscopio de luz.
3.2.2. Microscopio de campo oscuro.
3.2.3. Microscopio de contraste de fase.
3.2.4. Microscopio de polarización.
3.2.5. Microscopio de fluorescencia.
3.2.6. Microscopio electrónico.
3.3. Seminarios.

4.- ANATOMÍA Y FISIOLOGÍA DE ANIMALES DE LABORATORIO.
Objetivos específicos:
- Conocer y comprender la anatomía de animales de laboratorio (rata; ratón; cobayo; conejo).
- Comprender las técnicas apropiadas para extracción de órganos para su aplicación en el estudio histológico de tejidos y órganos obtenidos a partir de animales de laboratorio.
- Conocer las técnicas de sacrificio que no involucran sufrimiento para el animal .

Contenidos.
4.1. Introducción.
4.1. Bioterio.
4.2. Anatomía y Fisiología del ratón; rata; cobayo y conejo.

5.- MÉTODOS DE EXAMEN INMEDIATO.
Objetivos específicos:
- Conocer y comprender los principales métodos de estudio de material biológico fresco y fijado a la microscopía óptica.
- Conocer los fundamentos y aplicaciones que tienen las técnicas de disociación tisular.
- Conocer los fundamentos y aplicaciones de las técnicas para contrastar estructuras tisulares y celulares (estudios inmediatos y mediatos).
- Conocer las diferentes fuentes de muestras para estudio microscópico.

Contenidos.
5.1. Introducción.
5.2. Actividades de laboratorio.
5.2.1. Examen al fresco.
5.2.2. Disociación de tejidos.
5.2.3. Coloración vital y supravital.
5.3. Seminarios.

6.- FIJACIÓN.
Objetivos específicos:
- Conocer los fundamentos y la aplicación aquellos métodos básicos de la conservación de material biológico por medios físicos y/o químicos.
- Comprender las diferencias existentes entre sustancia preservante y sustancia fijadora.
- Conocer los atributos fundamentales del fijador ideal.
- Comprender la química de la fijación por medio de los principales agentes fijadores, tanto coagulantes como no coagulantes con énfasis en el formaldehído.
-Conocer las principales variables que participan para la adecuada conservación de células y tejidos.
- Conocer los fundamentos de la estabilización de material biológico por medio del uso de la energía de microondas y su aplicación en Técnica Histológica.
- Conocer aquellas procedimientos considerados como anexos a la fijación (lavado; decalcificación y desenkerización).
- Conocer los diferentes procedimientos utilizados en la descalcificación de material biológico.

Contenidos.
6.1. Introducción.
6.2. Actividades de Laboratorio.
6.2.1. Efectos de los fijadores sobre las proteínas.
6.2.2. Efectos de los fijadores sobre el volumen celular.
6.2.3. Penetración de los fijadores.
6.2.4. Fijación de los tejidos.
6.3. Seminarios.

7.- DESHIDRATACIÓN Y ACLARAMIENTO.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales agentes deshidratantes y aclarantes utilizados en la inclusión de material biológico, tanto para la microscopía óptica como electrónica.
- Conocer las principales propiedades o comportamiento químicos frente a los tejidos.

Contenidos.
7.1. Introdución.
7.2. Sustancias con capacidad deshidratante.
7.5.3. Sustancias con capacidad aclarante.
7.4. Seminarios.

8.- INCLUSIÓN.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales medios de inclusión utilizados en la preparación de material biológico para estudio tanto a la microscopía óptica como electrónica.
- Conocer los principales atributos de un buén medio de inclusión.
- Aplicar el conocimiento adquirido para la realización de un protocolo de inclusión para microscopía óptica.

Contenidos.
8.1. Introduccion.
8.2. Actividades de laboratorio.
8.2.1. Medio de inclusión acuosos.
8.2.2. Medios de inclusión anhidros.
8.3. Seminarios.

9.- MICROTOMÍA.
Objetivos específicos:
- Conocer los diferentes tipos de micrótomo (rotatorios; por deslizamiento; por congelación; etc).
- Conocer los fundamentos de la microtomía para material fijado en formalina e incluído en parafina.
- Conocer los diferentes tipos de artefacto de corte y la forma más adecuada de solucionar dichos problemas.
- Aplicar los conocimientos adquiridos en el corte de diferentes calidades de muestras biológicas.
- Conocer los diversos tipos de medios adhesivos utilizados en procedimientos de rutina para muestras incluídas en parafina.

Contenidos.
9.1. Introducción.
9.2. Actividades de laboratorio.
9.2.1. Micrótomos.
9.2.2. Métodos para la obtención de cortes.
9.2.3. Artefactos de técnica.
9.3. Seminarios.

10.- COLORANTES Y COLORACIÓN.
Objetivos específicos:
- Conocer y comprender la teoría del color.
- Conocer las diferencias entre sustancia coloreada y colorante.
- Conocer y comprender los diferentes conceptos asociados al color , la coloración y las sustancias colorantes: cromóforo; cromógeno; auxocromo; lisocromo.
- Conocer las diferentes criterios utilizados en la clasificaciónde las sustancias colorantes.
- Conocer y comprender las variables asociadas a la coloración diferencial: métodos empíricos (selectivos) y específicos.
- Conocer los tipos de coloración existentes.

Contenidos.
10.1. Introducción.
10.2. Actividades de laboratorio.
10.2.1. Teoría del color.
10.2.2. Formación de colorantes.
10.2.3. Teoría de la coloración.
10.3. Seminarios.

11.- COLORACIONES TOPOGRÁFICAS GENERALES. MONTAJE DE LAS PREPARACIONES.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales métodos de coloración utilizados para diferenciar núcleo de citoplasma.
- Conocer los fundamentos de los diferentes métodos estudiados.
- Aplicar el conocimiento adquirido en la coloración de diferentes tejidos.

Contenidos.
11.1. Introducción.
11.2. Actividades de laboratorio.
11.2.1. Coloración núcleo-citoplasmática.
11.2.2. Montaje de las preparaciones.
11.3. Seminarios.

12.- MÉTODOS DE IDENTIFICACÓN DE ALGUNOS ELEMENTOS DE LA MATRIZ EXTRACELULAR.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales métodos aplicados y la utilidad que estos tienen en Histología e histopatología en la caracterización de los diversos constituyentes de la matríz extracelular (fibras; substancia fundamental y glicoproteínas).
- Comprender los fundamentos de cada uno de los métodos para poder interpretar de manera adecuada los resultados.
- Aplicar el conocimiento adquirido en la coloración de diversos componentes de la matríz extracelular..

Contenidos.
12.1. Introducción.
12.2. Actividades de laboratorio.
12.2.1. Métodos para la identificación de fibras del tejido conjuntivo (colágena; elástica; reticular).
3. Seminarios.

13.- MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DEL TEJIDO MUSCULAR.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales métodos aplicados y la utilidad que estos tienen en Histología e histopatología para la caracterización de la fibra muscular estríada .
- Comprender los fundamentos de cada uno de los métodos para poder interpretar de manera adecuada los resultados.
- Aplicar el conocimiento adquirido en la coloración del tejido muscular estríado.

Contenidos.
13.1. Introducción.
13.2. Actividades de laboratorio.
13.2.1. Fijación.
13.2.2. Inclusión.
13.2.3. Métodos para la identificación de fibras musculares estríadas.
13.3. Seminarios.

14.- MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DEL TEJIDO ÓSEO. DESCALCIFICACIÓN.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales métodos aplicados en Histología y la utilidad que estos tienen en histopatología en la caracterización del tejido óseo.
- Comprender los fundamentos de cada uno de los métodos para poder interpretar de manera adecuada los resultados.
- Aplicar el conocimiento adquirido en la coloración del tejido óseo.

Contenidos.
14.1. Introducción.
14.2. Actividades de laboratorio.
14.2.1. Preparación de cortes finos mineralizados.
14.2.3. Preparación de cortes finos descalcificados.
14.3. Seminarios.

15.- MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE ELEMENTOS SANGUÍNEOS. TEJIDOS HEMATOPOYÉTICO Y FIBRINA.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales métodos aplicados y la utilidad que estos tienen en Histología e histopatología en la caracterización de los diversos constituyentes del tejido sanguíneo.
- Comprender los fundamentos de cada uno de los métodos para poder interpretar de manera adecuada los resultados.
- Aplicar el conocimiento adquirido en la coloración selectiva de los diversos componentes del tejido sanguíneo.

Contenidos.
15.1. Introducción.
15.2. Actividades de laboratorio.
15.2.1. Métodos para la identificación de tejido hematopoyético en cortes.
15.2.2. Métodos para la identificación de elementos sanguíneos.
15.2.3. Métodos para la identificación de fibrina.
15.3. Seminarios.

16.- MÉTODOS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS CITOLÓGICAS.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales métodos aplicados y la utilidad que estos tienen en Histología e histopatología para la caracterización de diversos constituyentes intracelulares.
- Comprender los fundamentos de cada uno de los métodos para poder interpretar de manera adecuada los resultados.
- Aplicar el conocimiento adquirido en la coloración de diversos componentes intracelulares.

Contenidos.
16.1. Introducción.
16.2. Actividades de laboratorio.
16.2.1. Métodos para la identificación del complejo de Golgi.
16.2.2. Métodos para la identificación de mitocondrias.
16.2.3. Métodos para la identificación de corpúsculos de Nissl.
16.2.4. Métodos para la identificación de cromatina sexual.
16.2.5. Métodos para la identificación de cromosomas metafásicos.
16.3. Seminarios.

17.- MÉTODOS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE TEJIDO NERVIOSO.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales métodos aplicados y la utilidad que estos tienen en Histología e histopatología para la caracterización de los diversos constituyentes del tejido nervioso (neuronas; neuroglia ; mielina y prolongaciones nerviosas.
- Comprender los fundamentos de cada uno de los métodos para poder interpretar de manera adecuada los resultados.
- Aplicar el conocimiento adquirido en la coloración de diversos componentes del tejido nervioso.

Contenidos.
17.1. Introducción.
17.2. Actividades de laboratorio.
17.2.1. Toma de muestra. Fijación.
17.2.2. Inclusión y corte.
17.2.3. Métodos histológicos generales.
17.2.4. Métodos histológicos especiales.
17.3. Seminarios.

18.- MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS.
Objetivos específicos:
- Conocer los principales métodos aplicados y la utilidad de estos en Histología e histopatología para la caracterización de diversos microorganismos (bacterias; virus; etc) .
- Comprender los fundamentos de cada uno de los métodos para poder interpretar de manera adecuada los resultados.
- Aplicar el conocimiento adquirido en la coloración de microoganismos de importancia en patología.

Contenidos.
18.1. Introducción.
18.2. Actividades de laboratorio.
18.2.1. Métodos de identificación de bacterias.
18.2.2. Métodos para la identificación de hongos.
18.2.3. Métodos para la identificación de inclusiones virales.
18.3. Seminarios.